多色荧光技术mFISH 小常识
日期：2024-11-05 06:53
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摘要：
mFISH顾名思义是多色FISH multi-coclour FISH或multiplex FISH, M-FISH 是在单色FISH基础上发展起来的多色FISH技术。该技术采用两种以上荧光标记DNA探针与靶细胞中期染色体或间期细胞核杂交后（可选用美国自然基因有限公司提供的Thermobrite-NatureGene杂交仪），用IMSTAR**荧光检测系统进行杂交信号的检测与放大，通过两种或多种不同滤光片组合或特制的一种滤光片观察，杂交信号呈现出不同的颜色。颜色取决于标记物连接的荧光物质和复染染料的不同。例如，连接物有AMCA（蓝色）FITC或dibopy（绿色）rhodamine 或Texas red（红色）复染的荧光染料有PI（红色）DAPI（蓝色）quinacrine(绿色)等。Dauwerse等采取结构标记（combination labelling）或比率标记(ratio lablling）的策略，以biotin digoxigeinh和FITC标记探针，不同比例混合后进行杂交，同时观察12种不同颜色的杂交结果。多色FISH技术可同时观察两种以上DNA探针的杂交信号，是研究几种不同探针之间关系的理想手段，如检测靶序列扩增水平，染色体微小缺失和染色体易位携带者。多色FISH还适用于诊断不同染色体区域的结构异常或同时存在的几种染色体数量异常。